RNA是样品细胞内承担信息传递任务的重要遗传物质,提取高质量的RNA是众多生物实验研究分析的基础操作;而高通量组织研磨仪则是从组织样本中提取RNA的常用实验设备。它的工作原理主要包括三个阶段:组织研磨、RNA释放和纯化。
一阶段:组织研磨。在实验开始前,需要先将组织样本放入离心管中,加入液氮进行快速的冷冻研磨。快速冷冻可以较大限度地保留组织样品内RNA的完整性,组织研磨将生物样本磨碎成细小片段,增加了表面积,便于后续样品的RNA释放。
二阶段:RNA释放。研磨后的组织样本需要离心去除残留的研磨介质和组织碎片;然后再加入裂解缓冲液,在高温条件下裂解组织释放出RNA。常用的裂解方法是三硫酸铵法,它可以有效破坏组织细胞,释放出细胞核内的RNA。此时离心去除不溶解的细胞碎片,获得上清液。
三阶段:RNA纯化。上清液中虽包含RNA,但还含有大量蛋白质、DNA等杂质。需要通过吸附法进一步纯化和浓缩RNA。常用的吸附填料是硅藻土,它可以吸附RNA而不吸附蛋白质和DNA。RNA富集在硅藻土颗粒表面,经过洗脱就可以获得高纯度的RNA提取液。
综上,高通量组织研磨仪RNA提取过程主要包括研磨释放、裂解离心和纯化三大步骤。研磨和裂解可以充分释放组织内RNA,离心除去杂质,而纯化则可以获得高质量的RNA产物。RNA的提取效率和质量除了取决于仪器性能,也与样品质量、操作技巧等相关。组织研磨仪的RNA提取技术为众多生物科学实验研究提供了基础,在生物学实验中发挥着重要作用。